1介绍
原理
酶标仪实际上就是一台变相光电比色计或分光光度计,其基本工作原理与主要结构和光电比色计基本相同. 图示是一种单通道自动进样的酶标仪工作原理图.光源灯发出的光波经过滤光片或单色器变成一束单色光,进入塑料微孔极中的待测标本.该单色光一部分被标本吸收,另一部分则透过标本照射到光电检测器上,光电检测器将这一待测标本不同而强弱不同的光信号转换成相应的电信号.电信号经前置放大,对数放大,模数转换等信号处理后送入微处理器进行数据处理和计算,最后由显示器和打印机显示结果. 微处理机还通过控制电路控制机械驱动机构X方向和Y方向的运动来移动微孔板,从而实现自动进样检测过程.而另一些酶标仪则是采用手工移动微孔板进行检测,因此省去了X,Y方向的机械驱动机构和控制电路,从而使仪器更小巧,结构也更简单.
微孔板是一种经事先包理专用于放置待测样本的透明塑料板,板上有多排大小均匀一致的小孔,孔内都包埋着相应的抗原或抗体,微孔板上每个小孔可盛放零点几毫升的溶液.
光是电磁波,波长100nm~400nm称为紫外光,400nm~780nm之间的光可被人眼观察到,大于780nm称为红外光。人们之所以能够看到色彩,是因为光照射到物体上被物体反射回来。绿色植物之所以是绿色,是因为植物吸收的大部分为红橙光和蓝紫光,但对绿色不吸收,反射出来,所以植物呈现为绿色。酶标仪测定的原理是在特定波长下,检测被测物的吸光值。
检测单位
光通过被检测物,前后的能量差异即是被检测物吸收掉的能量,特定波长下,同一种被检测物的浓度与被吸收的能量成定量关系。
检测单位用OD值表示, OD是optical density(光密度)的缩写,表示被检测物吸收掉的光密度, OD=log(1/trans),其中trans为检测物的透光值。根据Bouger-amberT-beer法则,OD值与光强度成下述关系:
E=OD=log(lo/Ι) 其中E表示被吸收的光密度, Ιo 为在检测物之前的光强度,Ι为从被检测物出来的光强度。
OD值由下述公式计算:
c为检测物的浓度 b为检测物的厚度 a为摩尔因子
在特定波长下测定每一种物质都有其特定的波长,在此波长下,此物质能够吸收最多的光能量。如果选择其它的波长段,就会造成检测结果的不准确。因此,在测定检测物时,我们选择特定的波长进行检测,称为测量波长。
但是每一种物质对光能量还存在一定的非特异性吸收,为了消除这种非特异性吸收,我们再选取一个参照波长,以消除这个不准确性。在参照波长下,检测物光的吸收最小。检测波长和参照波长的吸光值之差可以消除非特异性吸收。
检测值计算
仪器中的检测器接收透过被检测物的光能量,转换成二进位数字信号,最大为4095。仪器定义没有光源下的透光值为 0%,没有检测物的透光值为100%。则实际检测中,检测物的透光值均在 0%一100%之间。透光值
的计算如下:
T=(Meas—Min)/(Max—Min)
其中T为透光值, Meas为检测的二进位数值, Min为在 0%的情况下检测的二进位数值, Max为在100%的情况下检测的二进位数值,举例如下:
MaX=3600
Min=20
Meas=30
T=(30-20)/3600-20)=0.0028
OD=log(1/T)=log(1/0.0028)=2.552
中心定位
仪器会自动对酶标孔进行中心定位,中心定位是要消除酶标孔底的凸凹引起的厚薄不均带来检测的不准确。在对每一个酶标仪进行检测时,仪器其实要进行35个点的测量,选取最中间的5个点的均值为本孔的OD值。
光源的参照通道
参照通道是用来校准由于电压不稳或灯泡磨损带来的影响。
用途和其它提示
用于ELISA试剂的测定,广泛用于各种实验室,包括临床实验室。
质量控制
质量控制是试剂检测的重要因素。请按照试剂说明书的要求进行质量控制。
空白校正
有一些试剂盒的说明书将空白孔设置为空气,其它大多数空白孔的设置是用试剂来设置的,请按照试剂盒的说明书要求进行。
检测结果的解释
由于有相当多的因素会影响检测的结果,如不同的酶标板,检测试剂的体积,都会造成OD值的不同,因此,只有使用同一酶标板反应的试剂检测结果才能比较和分析。对结果的临床解释请依照试剂盒的说明书进行.
结构
规格有40孔板,55孔板,96孔板等多种,不同的仪器选用不同规格的孔板,对其可进行一孔一孔地检测或一排一排地检测.
酶标仪所用的单色光既可通过相干滤光片来获得,也可用分光光度计相同的单色器来得到.在使用滤光片作滤波装置时与普通比色计一样,滤光片即可放在微孔板的前面,也可放在微孔板的后面,聚光镜,光栏后到达反射镜,经反射镜作90°反射后垂直通过比色溶液,然后再经滤光片送到光电管.
从酶标仪工作框图和光路图上可看出,它和普通的光电比色计有以下几点差异:
(l)盛装待测比色液的容器不再使用比色皿,而是使用塑料微孔板.微孔板常用透明的聚乙烯材料制成,对抗原抗体有较强的吸附作用,故用它作为固相载体.
⑵由于盛样本的塑料微孔板是多排多孔的,光线只能垂直穿过,因此酶标仪的光束都是垂直通过待测溶液和微孔板的,光束既可是从上到下,也可以是从下到上穿过比色液.
⑶酶标仪通常不仅用A,有时也使用光密度OD来表示吸光度.酶标仪可分为单通道和多通道2种类型,单通道又有自动和手动2种之分.自动型的仪器有X,Y方向的机械驱动机构,可将微孔板L的小孔一个个依次送入光束下面测试,手动型则靠手工移动微孔板来进行测量.
在单通道酶标仪的基础上又发展了多通道酶标仪,此类酶标仪一般都是自动化型的.它没有多个光束和多个光电检测器,如 12个通道的仪器设有 12条光束或 12个光源,12个检测器和12个放大器,在X方向的机械
驱动装置的作用下,样品12个为一排被检测.多通道酶标仪的检测速度快,但其结构较复杂价格也较高.
摘自《陕西医学检验》1998.13⑷12
摘要 为提高酶标仪检测结果的室内重复性和增强室间可比性,对已建立的酶标仪性能评价与鉴定的基该方法进行了详细解释和补充,以供同行在评价、鉴定仪器时参考与应用。
用途
可广泛应用于低紫外区的DNA、RNA定量及纯度分析(A260/A280)和蛋白定量(A280/BCA/Braflod/Lowery),酶活、酶动力学检测,酶联免疫测定(ELISAs),细胞增殖与毒性分析,细胞凋亡检测(MTT),报告基因检测及G蛋白偶联受体分析(GPCR)等
2应用范围
分类 项目名称 简 称
血液学检验 血小板相关抗体的检验 PAIgA、PAIgG、PAIgM
D-二聚体的测定 D-Dimer
免疫学检验 C反应蛋白的测定 CRP
免疫球蛋白的测定 IgD、IgE
循环免疫复合物的测定 CIC
类风湿因子的测定 IgG、IgA、IgM类RF
肿癌免疫学检测 甲胎蛋白的测定 AFP
癌胚抗原的测定 CEA
卵巢癌的测定 CA125
乳腺癌的测定 CA15-3
宫颈鳞癌的测定 SCC
多发性骨髓癌的测定
甲状腺癌的测定 hTG
传染病免疫学检验 甲肝血清学的检测 抗HAV-IgM乙肝血清学的检测 两对半
丙肝血清学的检测 抗HAV-IgG、抗HCV-IgM
丁肝血清学的检测 抗HDV-IgG、抗HDV-IgM
戊肝血清学的检测 抗HEV-IgG
乙型脑炎病毒抗体的检测 IgM
人类免疫缺陷病毒抗体(即艾滋病)的检测 HⅣ β 2 M
优生优育功能检测 弓形虫(体)病毒的检测 TOXO
风疹病毒的检测 RV
巨细胞病毒的检测 CMV
单纯疱病毒的检测 抗HSV(Ⅰ、Ⅱ)
其它本仪器还可做基因检验及兽残、农残检验项目等
3选购指南
酶标仪(MicroplateReader)是对酶联免疫检测(EIA)实验结果进行读取和分析的专业仪器。酶联免疫反应通过偶联在抗原或抗体上的酶催化显色底物进行的,反应结果以颜色显示,通过显色的深浅即吸光度值的大小就可以判断标本中待测抗体或抗原的浓度。
酶标仪广泛地应用在临床检验、生物学研究、农业科学、食品和环境科学中,特别在近几年中,由于大量的酶联免疫检测试剂盒的应用,使得酶标仪在生殖保健领域中应用越来越广泛,同时促进了生殖健康技术水平提高。
目前国内许多计生站系统开展了酶免检测项目,如:乙肝五项、艾滋病检测、优生优育系列检测、激素检测等。过去多数采用目测方法,报出的结果缺乏科学的依据。例如:某弓形虫检测试剂盒中,临界值规定为:阴性对照品的OD值×2.5,通过目测无法判断标本孔的反应颜色是否超过临界值。肉眼进行两孔之间的颜色比较可能还行,但比较一孔的颜色是否超过另一孔颜色的2.5倍就不可能。
国内多家权威机构,如卫生部临床检验中心和计划生育系统等多次强调酶标仪的重要性,并要求酶联免疫检测试剂应使用酶标仪判读,酶免试剂的质控也应使用酶标仪,并提供酶标仪测定的原始数据,而各厂家的试剂盒说明书没有是让用目测的。同时酶免检测的项目往往是一些实质性的感染和病变(如:肝炎、艾滋病、优生优育等),判读更要求严谨,由误诊引起的纠纷很难处理。另外,住院手术病人术前的丙肝、艾滋等EIA试剂检测是避免因输血引起感染引发的医疗事故纠纷的必要手段,正逐渐被许多单位所采用。
4诊断方法
中国
免疫诊断方法主要有如下三种:酶免(EIA)、放免(RIA)和发光,在市场上的情况如下:
方法所处市场周期
放免衰退期
酶免成长期
发光进入期
放免技术由于试剂的污染和有效期等问题在国际和国内市场逐渐被淘汰,而化学发光试剂和设备比较昂贵,使得其在国内的普及特别在计生系统普及需要较长时间,EIA技术稳定,试剂价格合理,供应充,酶免技术在
中国市场处于成长期,因此购买酶标仪正合适宜。
尤其要提到的是,在
中国的计划生育和妇幼保健系统配备酶标仪已经迫在眉睫。早在几年以前,
世界卫生组织已建议对孕妇进行TORCH 五项常规筛查,但是遗憾的是由于缺乏酶标仪和洗板机等设备,RCH的检测在中国还未能普遍开展。TORCH感染在围产医学中称为
TORCH综合症,由于孕妇,胎儿和新生儿都易被感染,它已受到全世界妇产科和儿科的极大重视。
妊娠期感染不仅危害母体,往往还可对胎儿和新生儿产生严重影响。通过胎盘可引起子宫内感染而导致流产、早产、死胎或胎儿生长迟缓和畸形,通过产道和母乳可引起新生儿感染。如累及神经系统可造成不同程度的智力障碍以及各种瘫痪、失聪ORCH感染与优生优育有极为重要的关系。因此,RCH(IgG和IgM)检查通常也称为优生优育十项检查。目前,TORCH的检测方法主要有放免(RIA)和酶免(EIA)。由于放免方法需要特殊仪器,且有放射危害,目前正被酶免(EIA)方法取代。EIA方法具有特异性强,灵敏度高,简单快速,成本低等优点,只要配备有酶标仪和其他相应的设备,多数普通实验室均可方便地开展。很显然,尽快在计生系统普及酶标仪等设备是一个迫切的需求。
这项工作的落实将有助于提高诊治水平,降低母婴发病率,从而提高整个国民的健康素质。目前市场上提供的EIA试剂越来越多,如:T3、 T4、TSH、TORCH系列、不孕系列、各种癌症标志物、伤寒、副伤寒等,另外通过母婴传播的性传播疾病(如淋病、梅毒、HⅣ)和肝炎(如HBV、 HCV),以及胎儿的抗体,新生儿TSH的测定,疫苗反应等,市场上也都有成套EIA试剂盒供应。使用酶标仪有利于拓展检测项目,提高检测水平,其社会效益和经济效益并举。酶联免疫吸附试验方法简称酶标法,是标记技术中的一种,是从
荧光抗体技术、同位素免疫技术发展而来的一种敏感,特异,快速并且能自动化的现代技术.
5技术参数
Eon 全波长酶标仪
BioTek Eon 全波长读数仪具备微孔板和比色杯测量的双重功能,既可作为全波长酶标仪,也可作为全波长分光光度计使用。比色杯类型包括标准比色杯,以及Biocell微量比色杯。波长范围从200nm到1000nm,包括紫外和近红外,可以自由选择任何波长。
6工作
工作电压
220V/50HZ
工作温度
4--45℃
相对湿度
10%-90%。
工作环境
酶标仪是一种精密的光学仪器,因此良好的工作环境不仅能确保其准确性和稳定性,还能够延长其使用寿命。根据DINVDE0871条例,仪器应放置在无磁场和干扰电压的位置。依据DIN45635-19条例:
仪器应放置在低于40分贝的环境下。
为延缓光学部件的老化,应避免阳光直射。
操作时环境温度应在15℃-40℃之间,环境湿度在15%-85%之间。
操作电压应保持稳定。
操作环境空气清洁,避免水汽,烟尘。
保持干燥、干净、水平的工作台面,以及足够的操作空间。
7规格性能
光学系统
光栅光路系统,包括内建的参比检测通道,确保任何测量情况下获得一致的结果。
光路
长寿命闪烁氙灯光源,光栅单色光发生器,200 ~1000 nm波长范围内全波长扫描,1nm步进
检测模式
在微孔板检测模式和比色杯检测模式下均可进行全波长范围光谱扫描,对样品和空白同时扫描。
光谱扫描速度
10s,200~1000nm,1nm步进
样品前处理
无需衍生处理,即可直接测定DNA、RNA和蛋白的吸光值。
光程校准
使用微孔板检测时可直接读出OD值和浓度,对于水相溶液可使用光程校正
样品容器
可使用96&384孔板,或标准杯/微量杯
带宽
带宽2.4nm
读数范围
0 ~ 4 OD
线性范围
@450nm:0 ~ 2.5 Abs,±2%


检测准确度
@450nm:1%+0.003 Abs(0~2.0Abs),2%(2.0~2.5Abs)
检测精度
@450nm <1.0% CV
检测速度:
8s/96孔;13s/384孔
温控范围
微孔板和比色杯模式均具温控功能,温控范围(室温+4)~ 65℃
振荡模式
轨道,双轨道和线性三种调速振荡模式,动力学过程中可执行背景振荡模式
数据处理及分析
通过PC端数据分析软件Gen5进行操作和设置
曲线拟合、定量分析、定性分析、动力学计算、自定义方程以、平行线分析(PLA,符合欧盟法规要求)及效价分析等。数据可一键导出到Excel,也可生成详尽的结果报告。
电源
电源输入 100 - 240 V (50/60 Hz),最大功率消耗 90W
体积
外部尺寸(H x W x D) 216 x 216 x 406mm
重量
11kg
配置
全波长读数仪一套(含比色杯基座)(比色皿必须为立式),标准96孔酶标板一包,电源线壹根,说明书一份,软件光盘一张。
8操作规程
1开机
⒋1.1将酶标仪后部的电源开关灯打开,仪器将显示自检、基础酶联、软件版本号,随后显示基础酶联、准备和时间。在自检过程中,仪器对每一个已装的滤光片选择合适的光强度,开机后,等候1分钟预热。
⒋1.2开机后,测量模式1及其某些参数(如:单波长检测、1号滤光片、不作数据计算,进板方式、无板统计分析和打印机方式)都已默认。
2装纸
⒋2.1按下paper feed健,取下运输中装入打印机系统的纸张,将卷纸游离端插入仪器后部的插口,直至有轻微阻力感。注意卷纸转动的正确方向。
⒋2.2按下paper feed健,直至将纸送入打印机。将卷轴插入卷纸,将卷轴及卷纸放入仪器后部的凹槽。
3检测
选择程序模式时,先按shirt键,再按enter键。程序模式有:基础酶联软件、凝集检测软件、临界值定性软件、曲线回归定量软件。在确定程序模式后,进入自检并完成。在每个程序模式里选择所需的测量模式和参数、计算模式和参数。按star健开始检测。检测后,结果会输出至内置打印机或通过接口输出。
⒋3.1程序模式1——基础酶联软件:在检测前需选择好测量模式和计算模式及参数。
⒋3.1.1测量模式和测量参数
⒋3.1.1.1测量模式:通过mode键来选择,可通过↑↓键查看测量模式目录。也可通过数字键来选择测量模式。
⒋3.1.1.2测量参数:通过meas param键或enter键来选择,也可通过↑↓键和和数字键输入新参数。
可通过meas param键和enter键来选择默认值或以前设定的值。
⒋3.1.1.3在程序模式1中有以下测量模式的供选择:
⒋3.1.1.3.1单波长检测:用单波长测量吸光值。
⒋3.1.1.3.2双波长检测:用双波长测量吸光值。第二次检测结果从第一次检测中减得。
⒋3.1.1.3.3双时法检测:在两个不同的时间点上测量吸光值。第二次检测结果从第一次检测中减得。
⒋3.1.1.3.4酶标动力学检测:测量吸光值的变化速度。
⒋3.1.1.3.5多波长检测:每一列的吸光值用各自不同的波长检测。
⒋3.1.1.3.6计算机控制检测:仪器由一个外接计算机控制。
⒋3.1.1.4在程序模式1中有以下的测量参数可供选择:
⒋3.1.1.4.1力学检测:测量吸光值的变化速度。
⒋3.1.1.4.2空白
4 .3 .1 . 1 . 4. 2 .1空白种类:以下空白种类可在1 .2 .3 .4和5中选择。
1)无试剂空白。
2)单孔试剂空白:输入空白孔位置。
3) 列平均空白:输入空白列号(1-12);采用该列空白值(8个)的平均值为空白值。
4) 列空白:输入空白列号(1-12);每行采用各自不同的空白值。
5) 行平均空白:输入空白行号(A-H);采用该行空白值(12个)的平均值为空白值。
6) 行空白:输入空白行号(A-H);每列采用各自不同的空白值。
⒋3.1.1.4.2.2空白形式:
1)每板都设空白:
2)固定空白:用前一板的空白值,若选固定空白,在检测下一板前,须选择1.用旧空白2.重设空白。
⒋3.1.1.4.3结果形式(在测量模式2、3、和4中可选择)
⒋3.1.1.4.3.1最终结果:吸光值的差值。
⒋3.1.1.4.3.2全部结果:中间的全部结果(如滤光片1的吸光值,滤光片2的吸光值)。
⒋3.1.1.4.4时间设置:
⒋3.1.1.4.4.1间歇时间:(在测量模式3、和4中可选择)
连续检测板时的间歇时间。最短间歇时间为5秒,最长为17小时59分59秒。按时:分:秒输入时间。
⒋3.1.1.4.4.2延迟时间:(在测量模式4中可选择)
即在测量开始前的一段时间,最小延迟时间为0秒,最长为17小时59分59秒,按时:分:秒输入时间。4.3.1.1.4.4.3全部时间:(在测量模式4中可选择)
即整个反应所需时间,最小延迟时间为5秒,最长为17小时59分59秒,按时:分:秒输入时间。
⒋3.1.2计算模式和计算参数
⒋3.1.2.1计算模式:用calc mode(计算模式)键设定。可用箭头前后查找计算模式目录。
⒋3.1.2.2计算参数:用calc param(计算参数)或enter(回车)键设定计算参数。
⒋3.1.2.3请在程序模式1中选择以下的计算模式及参数:
⒋3.1.2.3.1无计算:结果以吸光值形式输出至内置打印机或通过界面接口输出。
⒋3.1.2.3.2因数计算:测出的吸光值和用户给出的因数相乘得出浓度,浓度单位由因数单位确定。
⒋3.1.2.3.3线性标准:用户输入标准品浓度,酶标仪通过这些标准品,利用最小平方法回归出一条标准直线,可将测得的吸光值换算成浓度。
⒋3.1.2.3.4标准直线:用户输入已知标准直线的斜率和截距来确定标准直线multiskan ms酶标仪用以下直线方程式计算浓度:浓度=A(斜率)×吸光值+B(截距)。
⒋3.1.2.3.5限值计算:测出的吸光值与用户定义的一个限值比较,如结果低于限值,会出现负号,相反,会出现正号。
⒋3.1.2.3.6双限值:测出的吸光值与用户的两个限值比较。如结果低于两个限值,会出现负号。如结果在两个限值之间出现0,如结果高于两个限值,会出现正号。
⒋3.1.2.3.7范围计算:用户定义的数值被分成10个部分,10个部分编号为0-9。测出的吸光值根据它所在的部分以0-9中的编号反映出来。
⒋3.1.2.3.8列减法:第二列的结果减去第一列结果,第四列的结果减去第三列结果,反之。
⒋3.1.2.3.9两点法:用户输入标准品浓度,multiskan ms酶标仪通过标准品计算出一条线性标准曲线。通过这一曲线,将测得的吸光值转换成浓度。
⒋3.2程序模式2:凝集反应软件(供选)
将ms酶标仪与计算机连接,进入ms程序模式2。选择滤光片、空白及参数。在计算机上启动计算机控制。开始测量,每孔将测得20个数据并输出至计算机。
⒋3.3程序模式3:临界值定性软件(可选)
⒋3.3.1程序模式3中有以下测量模式可选:单波长、双波长、双时法、动力学方法。
⒋3.3.2程序模式3中有以下测量参数可选:
⒋3.3.2.1滤光片
⒋3.3.2.2空白
⒋3.3.2.2.1空白种类:
1)无试剂空白
2)单孔试剂空白
3)列平均空白
4)列空白
5) 行平均空白
6)行空白
⒋3.3.2.2.2空白形式:
1) 板都设空白
2)固定空白
⒋3.3.2.3结果形式(在测量模式2、3、4中选择)
⒋3.3.2.3.1最终结果:吸光值的差值。
⒋3.3.2.3.2全部结果:中间的全部结果(如滤光片1的吸光值,滤光片2的吸光值)。
⒋3.3.2.4时间设置:
⒋3.3.2.4.1间歇时间 (在测量模式3、4中选择)
连续检测板时的间歇时间。最短间歇时间为5秒,最长为100分。按分:秒输入时间。
⒋3.3.2.4.2延迟时间 (在测量模式4中选择)
即在测量开始前的一段时间,最小延迟时间为0秒,最大为100分。按分:秒输入时间。4.3.3.2.4.3全部时间(在测量模式4中选择)
即整个反应所需时间,最小时间为5秒,最大为100分。按分:秒输入时间。
⒋3.3.3以下计算模式及他们的参数可在程序模式3中设定:
⒋3.3.3.1无计算:结果以吸光值输出至内置打印机或通过界面接口输出。
⒋3.3.3.2双限值:测出的吸光值与用户定义的两个限值比较。如结果低于两个限值,会出现负号。如结果在两个限值之间出现0,如结果高于两个限值,会出现正好。
⒋3.3.3.3范围计算:用户定义的数值被分成10个部分,10个部分编号为0-9。测出的吸光值根据它所在的部分以0-9中的编号反映出来。
⒋3.3.3.4临界值:测得的吸光值与临界值(用阳性或阴性对照测得的吸光值,通过临界值方程式计算所得)进行比较。
⒋3.4程序模式4:曲线定量软件(供选)
⒋3.4.1在程序模式4中有以下测量模式:
⒋3.4.1.1单波长检测:用单波长测。
⒋3.4.1.2双波长检测:用双波长测量吸光值。第二次检测结果从第一次检测中减得。
⒋3.4.1.3双时法检测:在两个不同的时间点上测量吸光值。第二次检测结果从第一次检测中减得。
⒋3.4.1.4动力学检测:测量吸光值的变化速度。
⒋3.4.2在程序模式4中有以下测量参数可选:
⒋3.4.2.1滤光片:在测量模式1234中输入滤光片的波长或滤光片号码。
⒋3.4.2.2空白。
⒋3.4.2.3结果形式。
⒋3.4.2.4时间设置。
⒋3.4.3在程序模式4中有以下计算模式和参数:
⒋3.4.3.1无计算:结果以吸光值形式输出至内置打印机或通过界面接口输出。
⒋3.4.3.2曲线定量:是S行曲线,例如用于激素和肿瘤标记物的定量测定。
⒋3.4.3.3计算参数:
标准品个数: 允许设2-8个标准品
每个标准品重复孔数: 每个标准品允许1-3个重复孔
标准品1的浓度: 输入标准品1的浓度
标准品1的重复孔位置: 输入标准品1重复孔的位置
标准品2的浓度 : 输入标准品2的浓度
标准品2的重复孔位置 : 输入标准品2重复孔的位置
每板都设标准品或固定标准品。
单位:无单位U/L,mIU/L,g/l,mg/l,ug/l,ug/ml,ng/ml,mmol/l,umol/,nmol,nmol/l
坐标1:LIN/LIN
坐标2:LIN/LOG
坐标3:LOG/LIN
坐标4:LOG/LOG
在测量结果和数据传送后,用户需选择1(接受结果)或2(重设新坐标)。如结果被接受,仪器会处于READY状态,如需重设坐标,需选择训新的坐标参数并按下PRINT键。新的结果将输出。如使用固定标准品,需选择:1.用原有曲线2.使用新曲线。
4计算机控制
⒋4.1在程序模式1和2中,可使用一个外接计算机取代酶标仪上的键盘。
⒋4.2计算机控制通过RS-232C接口实现。
⒋4.3计算机控制由选择测量模式6中实现,也可在仪器设置DTR为高级状态并且仪器显示READY后输入一个R命令实现。
⒋4.4回到键盘操作:按STOP键或输入Q命令。
5储存程序
⒋5.1用户设定的程序可储存在仪器内存中,以备后用。
⒋5.2储存可用SAVE键后,仪器要求给出程序编号(1-4),输入程序编号,仪器将显示“储存数据”。
以后要使用储存程序时,按RECALL键调出,并输入该程序编号即可。
9操作事项
酶标仪的功能是用来读取
酶联免疫试剂盒的反应结果,因此要得到准确结果,试剂盒的使用必须规范。许多医院在使用酶标仪之前是通过目测判断结果,操作过程随意性较大,在使用酶标仪后如果不能及时纠正操作习惯,会造成较大误差。在酶标仪的操作中应注意以下事项:
使用加液器加液,加液头不能混用。
洗板要洗干净。如果条件允许,使用洗板机洗板,避免交叉污染。
严格按照试剂盒的说明书操作,反应时间准确。
在测量过程中,请勿碰酶标板,以防酶标板传送时挤伤操作人员的手。
请勿将样品或试剂洒到仪器表面或内部,操作完成后请洗手。
如果使用的样品或试剂具有污染性、毒性和生物学危害,请严格按照试
剂盒的操作说明,以防对操作人员造成损害。
如果仪器接触过污染性或传染性物品,请进行清洗和消毒。
不要在测量过程中关闭电源。
对于因试剂盒问题造成的测量结果的偏差,应根据实际情况及时修改参数,以达到最佳效果。
使用后盖好防尘罩。
出现技术故障时应及时与厂家联系,切勿擅自拆卸酶标仪。
10技术参数
常规
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波长选择
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单色器
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读板方法
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终点法,动力学法,光谱扫描法,孔域扫描法
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微孔板类型
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6-384孔板,Take3和Take3 Trio微量检测板
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其他实验室设备
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标准比色杯 (EonC 型号)
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温度控制
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环境以上+4°C 至 65°C
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震荡
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轨道,双轨道和线性
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软件
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Gen5™ 数据分析软件
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自动化
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BioStack™ 和第三方自动化设备兼容
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吸光度
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光源
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氙闪灯
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波长范围
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200-999nm,1nm步进
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带通
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2.4 nm
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动态范围
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0.0 - 4.0 OD
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单色器波长准确性
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+2 nm
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单色器波长可重复性
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+0.2 nm
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OD 准确性
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0 - 2.0 OD + 1% + 0.010 2.0 - 3.0 OD + 3% + 0.010
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OD 线性
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0 - 2.0 OD + 1% + 0.010 2.0 -3.0 OD + 3% + 0.010
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OD 可重复性
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0 - 2.0 OD + 1% + 0.0052.0 - 3.0 OD + 3% + 0.005
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读板速度
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96 孔板: 8 秒 384 孔板: 13 秒
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物理特性
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连续性的
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USB 和RS232串口进行PC连接
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功率
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100 – 240 Volts AC 50/60 Hz
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尺寸
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16" 长 x 8.5" 宽 x 8.5" 高 (40.6 cm x 21.6 cm x 21.6 cm)
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重量
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<24 lbs (11 kg)
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11常见故障
一、 常见故障
1、 打印机不工作
⑴ 酶标仪后部DIL开关设置不正确。DIL标准设置:左 下下下下下下上下 上上下下上下上上 右(人站在仪器后部,面向仪器)。
⑵ 酶标仪内置打印机开关处于开的位置。应在总参数中设置内置打印机为关。
⑶ 打印机接口接错(接在了计算机接口上了)。应将打印机联系接在DIL开关正下方的打印机接口上,RS-232接口为计算机接口。
⑷ 打印机联线有问题:有些配备的新打印机联线仍有问题,请确保打印机联线无问题。
⑸ 打印机未联机,请确认打印机上的联机键已联机。
⑹ 打印机无纸或纸未装好,请装好打印纸。
⑺ 有些打印机有开机顺序,有的需先开打印机,后开仪器;有的需先开仪器,后开打印机。
2、 调不出所编程序
必须在相应程序模块下调出。如在临界值模块下编辑储存的程序必须要在临界值模块下调出。
3、 肉眼结果与酶标仪测定结果差异较大
⒊1 滤光片设置不正确:请在“参数”中按滤光片轮中实际的情况设置滤光片。
⒊2 空白或阴性位置不正确。
二、 仪器的检查测试
1、 检测电源部分的输出电压
电源部分输出电压可以通过检测MUSCU板上X11元件得到,每个点的正确对地电压应该是(顺序为从左至右):5V、0V(地电压)、15V、24V、-15V、0V。
2、 光源电压的测试和调节
测量光源电压,如果发现所测的结果不符合规定要求可以调节电源上的R39元件。其操作步骤如下:
⑴ 打开电源开关,使仪器处在工作状态。
⑵ 用电压表测量光源电压,正常电压应在6.7~6.9V之间。
⑶ 选择405nm波长的程序,按“开始”键,同时测量光源处电压,正常值应在7.5~8.1V之间。
⑷ 如果光源电压不正常,关闭电源开关。旋松测量部分上盖螺丝并移去上盖。
⑸ 旋松轨道部分的固定螺丝并移动轨道部分(要特别小心以防损伤轨道部分和主板及电源部分的连线!),能看到轨道下面的电源即可。
⑹ 打开电源开关,调节电源上R39元件,再重复上面步骤2测量光源电压,一直到正确为止。
三、 仪器的校正
1、 调节显示屏幕的亮度
这可以通过调节MUSCU板上的R14元件来实现。
2、 检查同步性
⑴ 转动断路器轮
把示波器的探针接在电路板MUSCU2的D29元件的第二个脚上测定信号的周期,正确的值应该介于5.1ms~5.4ms之间。如果超出这个范围,可以通过调节CHOPT电路板上R3元件来校正。检测活动结束后要用带有颜色的漆锁定它的正确位置。
⑵ 检查同步性
a) 按“计算模式”键,选择1“调整”,再按“输入”键选择9“连续测量”,再按“输入”键两次选择增益0,并按“输入”键。
b) 当在MACU2板D7元件的第14脚上测量信号的A/D转换时,测得的时段信号应该在信道的中间。如果不符,可以通过上下移动CHOPT板来调整。
3、 调整时钟频率
⑴ 按“计算模式”选择1“调整”,再按“输入”选择10“时钟频率”,再按“输入”。
⑵ 用频率计数器在MUSCU板上的D28元件的第13脚处测定时钟频率,正确的值应该为fck=32768Hz。这可以通过调节该板上的电容器C4来校正。
⑶ 值得注意的是,在这个测定过程中不能用“停止”键中断这个过程。
4、 存储机器的系列号
按“计算模式”选择2“测试”,按“输入”选择4“重复性20次”,按“输入”键两次。输入机器号(353……),按“停止”两次。
四、 仪器的检验
1、 重复性:
在一定条件下所获得的独立的测定结果之间的一致性程度即可重复性,可用CV值来表示。在某一特定的滤光片下测定某一块酶标板20次,用统计学方法求出所有测量值的均值和标准差。公式如下:
所有测量值的标准差
CV %= ————————————×100%
所有测量值的均值
2、 精确性:
待测物的测定值与一可接受的参考值之间的差异。此项指标需用雷勃公司标准板(PVT)来测。
测量值 - 参考值
精确性= —————————— ×100%
参考值
3、 光路检测:
将一块酶标板正放测量一次,再将酶标板反放测量一次,查看同一孔吸光值是否相同,从而查看其所有光路8通道是否均一。
⑴ 查看光路上的透镜是否清洁。
⑵ 灯泡好否及亮度是否正常。
⑶ 滤光片是否清洁。
4、 载轨运动:
开机后酶标仪能否自检,自检结束后揿“开始”,查看载轨运动是否正常及有无噪声。
5、 按键膜的好坏:
开机后试用所有按键膜,查看其功能是否完好。